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大小鼠脊髓模具的規(guī)范操作方法分享

點(diǎn)擊次數(shù):25 更新時(shí)間:2026-01-01

   大小鼠脊髓模具是一種專用于神經(jīng)科學(xué)研究中脊髓組織精準(zhǔn)定位、固定與切片制備的實(shí)驗(yàn)輔助工具,廣泛應(yīng)用于脊髓損傷、神經(jīng)退行性疾病及藥物干預(yù)等動(dòng)物模型研究。其通過標(biāo)準(zhǔn)化槽道設(shè)計(jì),確保脊髓在灌注、取材、冰凍或石蠟包埋過程中保持解剖完整性與空間一致性,從而提升組織切片質(zhì)量與實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。掌握大小鼠脊髓模具科學(xué)、規(guī)范的操作方法,是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的關(guān)鍵。

 


  一、使用前準(zhǔn)備
  清潔模具:使用前以75%乙醇擦拭或超聲清洗,去除殘留組織或固定液,避免交叉污染;
  預(yù)冷處理:冰凍切片用模具需提前置于–20℃冰箱或干冰上預(yù)冷,防止組織融化;
  匹配規(guī)格:根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類選擇對應(yīng)模具——小鼠模具槽道長約3–4cm,大鼠約4–5cm,直徑適配胸腰段脊髓(小鼠Φ1.5–2mm,大鼠Φ2.5–3mm)。
  二、脊髓取材與置入規(guī)范
  動(dòng)物經(jīng)心臟灌注生理鹽水及4%多聚甲醛后,迅速取出整段脊柱,置于冰冷PBS中;
  在解剖顯微鏡下小心剝離椎骨,完整取出脊髓,避免牽拉或擠壓;
  將新鮮或固定后的脊髓輕柔置入模具中央槽道,確保頭尾方向一致,無扭曲或折疊。
  三、包埋與固定操作
  冰凍切片:注入OCT包埋劑至沒過脊髓,傾斜緩慢排除氣泡,–80℃速凍;
  石蠟切片:將模具連同脊髓轉(zhuǎn)入脫水梯度,再浸蠟包埋,確保組織與蠟充分融合;
  包埋過程中可用細(xì)針輕壓脊髓,使其貼合槽底,防止漂浮偏移。
  四、脫模與切片要點(diǎn)
  冰凍塊從模具中輕敲脫出,若粘連可短暫回溫1–2秒;
  切片時(shí)使脊髓橫斷面垂直于刀片,確保獲得標(biāo)準(zhǔn)橫切面;
  對縱切實(shí)驗(yàn),可選用帶縱向槽道的專用模具,或旋轉(zhuǎn)90°放置脊髓。
  五、使用后維護(hù)
  切勿用金屬器械刮擦模具內(nèi)壁,以免劃傷影響后續(xù)組織貼合;
  OCT殘留可用溫水浸泡軟化后沖洗,石蠟殘留用二甲苯溶解;
  干燥后存放于潔凈盒中,避免灰塵沉積。

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